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化妝品安全性評價(jià)試驗方法:皮膚變態(tài)反應試驗(一)

2022-07-08 11:38:25
化妝品安全性評價(jià)試驗方法:皮膚變態(tài)反應試驗(一)

  化妝品安全性評價(jià)試驗方法中的皮膚變態(tài)反應試驗分為:皮膚變態(tài)反應試驗、皮膚光青和光變態(tài)反應試驗、皮膚光變態(tài)反應試驗。
 

皮膚變態(tài)反應試驗

  皮膚變態(tài)反應是指通過(guò)重復接觸某種物質(zhì)后機體產(chǎn)生免疫傳遞的皮膚反應。化學(xué)

  物質(zhì)引起的變態(tài)性接觸性皮炎,屬I(mǎi)V型(即延遲型)變態(tài)反應,在人類(lèi)的反應可能.

  是瘙癢、紅斑、丘疹、水皰或大皰,動(dòng)物僅見(jiàn)皮膚紅斑和水腫。
 

試驗方法的原則

  由于接觸致敏的發(fā)病過(guò)程致敏(誘導)和激發(fā)兩個(gè)階段,動(dòng)物在* 次接觸受試物后至少1周,再次給予激發(fā)接觸。通過(guò)激發(fā)接觸能否引起皮膚反應確有無(wú)致敏作用。

  實(shí)驗*動(dòng)物為白色豚鼠,每組動(dòng)物數10~25只。

  豚鼠*大值試驗(皮內和涂皮結合法,簡(jiǎn)稱(chēng)GPMT )
 

  從頭部向尾部成對地做三次皮內注射。(1) 注射0.1mlFCA; (2) 注射0.1ml受試物; (3)注 0.1ml受試物與FCA的等量混合物。如圖1所示,各點(diǎn)間距1. 5cm。
 

  注射后第8天,用2cmX 4cm濾紙涂以用適當賦形劑(花生油、凡士林、羊毛脂等)配制的受試物,將其貼敷在上背部的注射部位,持續封閉固定48小時(shí),作為第二次致敏。為加強致敏作用,對無(wú)皮膚刺激作用的化學(xué)物質(zhì),可在第二次致敏前24小時(shí),在注射部位涂抹10%十二烷基硫酸鈉(SLS)。對照組僅用溶劑或賦形劑注射或涂抹。
 

  激發(fā)接觸,即在末次致敏后14~28天,分別用2cmX 2cm的濾紙涂以受試物,再次貼敷在上背部?jì)蓚鹊娜ッ珔^,持續封閉和固定24小時(shí)。對照動(dòng)物作同樣處理。

  激發(fā)接觸后,24、28和72小時(shí)觀(guān)察反應,按表6進(jìn)行皮膚反應強度評分。
 

局部封閉涂皮法(Buehlertest簡(jiǎn)稱(chēng)BT)

  實(shí)驗前24小時(shí),用脫毛劑將豚鼠背部左側3cmX 3cm范圍區脫毛。
 

  將受試物0. 1~0.2ml涂在2cmX 2cm濾紙上,并將其敷貼在去毛區,二層紗布一層油紙覆蓋,再以無(wú)刺激膠布封閉固定,持續6小時(shí)。第7天和第14天以同樣方法重復一欠。
 

  激發(fā)接觸,即末次致敏后14~28天,將0.1~0. 2ml或低于誘導濃度的受試物斑貼于豚鼠背部左側2cmX2cm去毛區(接觸前24小時(shí)脫毛),然后用二層紗布、一層油紙和無(wú)刺激膠布固定6小時(shí),將斑貼受試物拿掉, 24和48小時(shí)后觀(guān)察皮膚反應,按表5評分。
 

  對照動(dòng)物僅給了激發(fā)接觸。

  木試驗要求動(dòng)物數每組10~20只。

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