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化妝品安全性評價(jià)試驗方法:動(dòng)物骨髓嗜多染細胞微核試驗

2022-07-07 13:13:26
化妝品安全性評價(jià)試驗方法:動(dòng)物骨髓嗜多染細胞微核試驗

  化妝品安全性評價(jià)試驗中的鼠傷寒沙門(mén)氏菌回復突變試驗(Ames)試驗、哺乳動(dòng)物骨髓細胞染色體畸變檢測試驗、動(dòng)物骨髓嗜多染細胞微核試驗和小鼠精子畸形檢測試驗介紹。
 

動(dòng)物骨髓嗜多染細胞微核試驗

  研究化學(xué)物誘發(fā)哺乳動(dòng)物染色體畸變的方法很多,微核試驗以其簡(jiǎn)便、快速、具

  有一定的敏感性,被廣泛用于遺傳毒理學(xué)研究中。
 

目的

  該試驗是一種用體內試驗來(lái)檢查骨髓細胞染色體畸變的方法,特別適用于檢出紡錘體的部分損害而出現的染色體丟失或染色單體的無(wú)著(zhù)絲點(diǎn)片段
 

實(shí)驗動(dòng)物和劑量分組

  小白鼠是微核試驗的常規動(dòng)物,也可選用大白鼠,一般常用體重為25~30g的小鼠或體重為150~200g的大鼠,雌雄皆可,每個(gè)劑量組至少5只動(dòng)物,另外設溶劑對照組和陽(yáng)性物組。常用環(huán)磷酰胺做為陽(yáng)性對照物。
 

  根據受試物理化性質(zhì)(尤其是水溶性脂溶性),確定受試物所用的溶劑,常用水、植物油(玉米油等)或吐溫-80等溶濟。劑量的選擇是很重要的,用藥量太低,會(huì )漏掉陽(yáng)性物,用藥量太大,可致動(dòng)物死亡,或因對骨髓毒性作用太強,致使嗜多染紅細胞受到抑制,難以獲得正確的結果。一般取受試物 LD50的1/2、 1/5、1/10、 1/20等劑量,以求獲得微核的劑量一反應關(guān)系曲線(xiàn)。
 

給藥途徑和方式

  給藥途徑視試驗目的而定,常用經(jīng)口灌胃方式,建議采用30小時(shí)給藥法,即兩次給藥間隔24小時(shí),第二次給藥后6小時(shí)取材。
 

試驗方法

  骨髓液的制取

  動(dòng)物脫頸處死,打開(kāi)胸腔,沿著(zhù)胸骨與肋骨交界處剪斷,剝掉附著(zhù)胸骨上的肌肉,擦凈血污,橫向切斷胸骨,暴露止髓腔,然后用小骨血鉗擠出胸骨骨髓液。

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